北京师范大学普通生物学实验（细胞与分子）薛秀花 主讲视频教程

毒蛇花花

课程名称: 北京师范大学普通生物学实验（细胞与分子）薛秀花 主讲视频教程+课件讲义 国家级精品课程

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课程简介:   

普通生物学实验课程由北京师范大学生命科学与技术国家级实验教学示范中心团队共同开发，实验项目来源于学院本科生的优质实验课程及其长期教学积累。本课程着重从分子和细胞水平设计系列实验项目，从模式生物果蝇的唾液腺染色体标本制作观察，质粒DNA分子的提取到大肠杆菌转化与筛选，进而学习难度较大、无菌操作要求较高的细胞培养技术，基于此进一步学习如何获得转基因植物。实验内容以解决问题为导向，注重多种实验技术与方法的综合应用。

本课程的实验项目包括教师讲解、实验操作、虚拟仿真三部分。讲解部分着重从实验设计和技术应用层面介绍实验背景，有助于学生理解实验内容，培养学生科研思维能力；实验操作部分以微距近景的方式呈现完整的实验流程，使学生进一步理解实验设计，掌握操作细节；虚拟仿真项目让学生通过操作模拟的方式完成实验过程，掌握实验技术与方法，弥补实验类慕课让学生无法自主进行实验操作的问题，辅助提升教学效果。

授课老师：  

薛秀花 工程师

尹燕霞 高级实验师

李洁 实验师

课程目录：  


01
果蝇唾液腺染色体制片与观察
本实验主要介绍果蝇唾腺巨大染色体的制备与观察实验，让学生掌握果蝇唾腺巨大染色体标本制备技术；理解唾腺染色体的结构特征，识别巨大染色体的带型、疏松区等；了解果蝇唾腺染色体在遗传学研究中的作用与意义。重难点：掌握唾腺染色体的剥取方法、酸解漂洗时防止唾腺组织丢失、制片时注意压片的角度和力度。
课时
1.1 果蝇唾液腺染色体制片与观察（实验理论）
1.2 果蝇唾液腺染色体制片与观察（实验操作）
1.3 虚拟仿真果蝇唾液腺染色体制片与观察
1.4 3D虚拟仿真体视镜和显微镜的使用
1.5 果蝇在生物学研究中的应用（实验理论）
02
无菌操作技术及主要仪器设备的使用
本实验主要介绍动物细胞培养实验中必备的无菌操作技术，让学生建立无菌概念，掌握消毒和灭菌的方法、无菌操作技能以及主要仪器设备的操作和使用规范。重难点：掌握细胞培养无菌室的清洁与消毒、掌握细胞培养用品的包装与灭菌、主要仪器设备的规范操作。
课时
2.1 动物细胞培养的无菌准备（实验理论）
2.2 动物细胞培养的无菌准备（实验操作）
细胞培养无菌室的清洁与消毒
酒精棉球和酒精灯的准备
细胞培养用品清洗、包装与灭菌
细胞培养基的配制和过滤
溶液的针头滤器过滤除菌
2.3 主要仪器设备的虚拟操作
高压灭菌锅、超净工作台、移液器、电子天平和离心机等的主要仪器设备的虚拟操作训练
03
质粒DNA提取与电泳检测
本实验主要介绍提取质粒DNA最常用的碱裂解方法，让学生掌握质粒DNA的提取与电泳分析方法和操作技术，理解碱裂解法提取质粒的基本原理及其实验设计思路。重难点：提取质粒DNA的实验设计、碱裂解细胞和粗提质粒DNA时的关键操作。
课时
3.1质粒DNA提取与电泳检测（实验理论）
3.2 质粒DNA提取与电泳检测（实验操作）
细胞扩增
细胞破碎与粗提
质粒纯化
质粒浓缩与保存
琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA
3.3 虚拟仿真琼脂糖凝胶电泳
04
感受态细胞的制备及转化
本实验主要介绍大肠杆菌感受态细胞制备及转化、三亲结合转移法转化蓝藻细胞的设计理念以及农杆菌感受态细胞制备及转化实验操作，让学生掌握大肠杆菌及农杆菌感受态细胞的制备及转化的操作技巧。重难点：大肠杆菌和农杆菌感受态细胞的制备与转化的操作技巧。
课时
4.1大肠杆菌感受态细胞的制备及转化（实验理论、实验操作）
4.2农杆菌感受态细胞的制备及转化（实验操作）
4.3三亲结合转移法转化蓝藻细胞（实验理论、实验操作）
05
拟南芥转基因技术
本实验主要介绍含目的基因的农杆菌感扩大培养、拟南芥的室内栽培，拟南芥花序浸润法转基因技术及其转基因阳性植株的筛选。让学生掌握植物转基因技术的原理及操作方法。 重难点：农杆菌扩大培养的操作技巧、拟南芥花序浸润法转化技术的原理及操作技巧。
课时
5.1 拟南芥花序浸润法转基因技术（实验理论）
5.2 拟南芥花序浸润法转基因技术（实验操作）
含1300-GFP质粒的农杆菌的扩大培养
拟南芥生活周期
拟南芥花序浸润法转化
拟南芥种子的收集
拟南芥无菌播种
转基因拟南芥的筛选及培养
5.3 模式植物拟南芥的介绍
06
植物组织培养技术
本实验主要介绍植物细胞全能性理论以及Skoog和Miller的激素学说在植物组织培养中的应用，运用植物组织培养技术进行愈伤组织诱导与器官发生实验方案设计理念及操作方法。让学生掌握植物培养基配制方法，植物组织培养技术的原理及操作方法。 重难点：MS培养基配制方法、愈伤组织诱导与器官发生实验的方案设计、植物组织培养技术的原理及操作方法。
课时
6.1 植物组织培养技术（实验原理）
6.2 植物组织培养技术（实验操作）
MS培养基的配制
植物组织诱导培养基配制
外植体的选择和消毒
外植体接种
植物组织培养结果观察
07
细胞复苏与计数
本实验主要介绍动物细胞复苏和细胞计数的操作方法，死活细胞和常见细胞污染的鉴别。让学生掌握动物细胞复苏和细胞计数的操作技巧，理解细胞复苏的原理。 重难点：细胞复苏的方法、细胞计数的操作技巧、细胞污染的鉴别。
课时
7.1 细胞复苏与计数（实验原理）
7.2 细胞复苏与计数（实验操作）
完全培养基配制
快速融化冻存细胞
细胞计数
复苏细胞培养
08
细胞传代
本实验主要介绍动物细胞传代操作方法，倒置显微镜的使用方法。让学生掌握细胞传代操作方法。重难点：细胞传代的方法及操作技巧。
课时
8.1 细胞传代培养（实验原理）
8.2 细胞传代培养（实验操作）
DMEM完全培养基配置
细胞消化
分瓶培养
09
细胞冻存
本实验主要介绍动物细胞冻存操作方法，细胞冻存的原理及操作方法，倒置显微镜的使用方法。让学生掌握细胞传代与冻存操作方法，理解细胞冻存的原理。重难点：细胞传代的方法、细胞冻存的原理及操作技巧。
课时
9.1 细胞冻存（实验原理）
9.2 细胞冻存（实验操作）
冻存液配置
细胞消化
冻存细胞
10
血型测定与血细胞凝集
本实验主要介绍血型类型及测定方法，血细胞凝集的原理。重难点：血型测定方法和血细胞凝集原理。
课时
血型测定与血细胞凝集（实验操作）
11
期末考试
本周为期末复习和测试周。重难点：观看和学习本学期所有的教学视频，提交单元测试题答案，并完成期末测试提交答案。
课时
11.1 复习本学期所有教学视频
11.2 参加期末测试提交答案

教材：  

参考资料

    1.《普通生物学实验（细胞与分子）》，自编讲义

    2. 张根发、梁前进，遗传学实验（第2版），北京师范大学出版社，2017.09

    3. 魏群 尹燕霞等，分子生物学实验指导（第3版，“十二五”规划教材），高等教育出版社，2015.03

    4. 桑建利、谭信，细胞生物学实验指导，科学出版社，2010.02

    5. 陈炳华主编，普通生物学实验，科学出版社，2012.09